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real-time PCR 1、總RNA抽提(槍頭和離心管均經(jīng)過濕熱滅菌,無RNA酶) 1)取勻漿器,加入1ml的Trizol Reagent,置冰上預(yù)冷。 2)取100mg組織,加入到勻漿器中。 3)充分研磨直至無可見組織塊。
WB(普通蛋白,磷酸化蛋白),通過電泳區(qū)分不同的蛋白組分,并轉(zhuǎn)移至固相支持物(膜),通過特異性試劑(抗體)作為探針,對靶物質(zhì)進行檢測??蓹z測到低至1~5ng(可到10~100pg)中等大小的靶蛋白。
原位雜交(綠色熒光單標(biāo)),原位雜交原理:原位雜交是指將特定標(biāo)記的已知順序核酸為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交,從而對特定核酸順序進行定量定位的過程。原位雜交可以在細胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進行。
原位雜交(紅色熒光單標(biāo)),原位雜交原理:原位雜交是指將特定標(biāo)記的已知順序核酸為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交,從而對特定核酸順序進行定量定位的過程。原位雜交可以在細胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進行。
超薄切片(透射電鏡)是使用超薄切片機將樹脂包埋的樣本進行切片,切片厚度一般為50-80nm左右,用無碳芳華膜銅網(wǎng)進行撈片,然后重金屬染色,常溫干燥保存