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免疫組化服務(wù)

簡要描述:免疫組化服務(wù)
1、 石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-85%酒精5min-75%酒精5min-蒸餾水洗。

  • 產(chǎn)品型號:茁彩生物
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2024-09-29
  • 訪  問  量:4358
詳情介紹


免疫組化服務(wù)實驗收費標(biāo)準(zhǔn):

項目編號項目名稱計價單位單價

ZC1068

免疫組化

35元



實驗結(jié)果展示:

免疫組化服務(wù)


免疫組化服務(wù)實驗流程:

  石蠟切片免疫組化實驗步驟:

      1、 石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-85%酒精5min-75%酒精5min-蒸餾水洗。

      2、 抗原修復(fù):組織切片置于盛滿EDTA抗原修復(fù)緩沖液(PH9.0)的修復(fù)盒中于微波爐內(nèi)進行抗原修復(fù),中火8min至沸,?;?min保溫再轉(zhuǎn)中低火7min,此過程中應(yīng)防止緩沖液過度蒸發(fā),切勿干片。自然冷卻后將玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。

      3、 阻斷內(nèi)源性過氧化物酶:切片放入3%過氧化|氫溶液(雙氧水:純水=1:9),室溫避光孵育25 min,將玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。

      4、 BSA或者血清封閉:切片稍甩干后用組化筆在組織周圍畫圈(防止抗體流走),在圈內(nèi)滴加用3%BSA或者10%正常兔血清均勻覆蓋組織,室溫封閉30min。(一抗是山羊來源用10%正常兔血清封閉,一抗其它來源的用3%BSA封閉)

      5、 加一抗:輕輕甩掉封閉液,在切片上滴加PBS按一定比例配好的一抗,切片平放于濕盒內(nèi)4°C孵育過夜。(濕盒內(nèi)加少量水防止抗體蒸發(fā))

      6、 加二抗:玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加與一抗相應(yīng)種屬的二抗(HRP標(biāo)記)覆蓋組織,室溫孵育50min。

      7、 DAB顯色:玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下控制顯色時間,陽性為棕黃色,自來水沖洗切片終止顯色。

      8、 復(fù)染細(xì)胞核:Harris蘇木素復(fù)染3min左右,自來水洗,1%的鹽酸酒精分化數(shù)秒,自來水沖洗,氨水返藍(lán),流水沖洗。

      9、 脫水封片:將切片依次放入75%酒精6min-85%酒精6min --無水乙醇Ⅰ6min -無水乙醇Ⅱ6min -二甲苯Ⅰ5min 中脫水透明,將切片從二甲苯拿出來稍晾干,中性樹膠封片。

     10、 顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。








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